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發(fā)布日期:2022-03-03 點擊量:581
PCR實驗室污染應急處理方法
PCR檢測因其高靈敏度、快速、操作方便等優(yōu)勢已經被廣泛應用,不過正是由于它靈敏度極高,極微量的污染源都有可能導致檢測結果的假陽性,因此,如何避免以及處理實驗室污染,對PCR人來說是一門必修課。
1、樣本間交叉污染
主要是在采(?。拥倪^程中,由于取樣工具之間的交叉造成污染;或者在核酸提取的過程中,由于移液器、離心管等使用不當導致的污染。?
2、PCR試劑的污染
主要是在PCR試劑配制過程中,由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。
3、克 隆質粒的污染
在實驗室操作中經常會用到陽性參考品,這些陽性參考品大多數(shù)是由某些克 隆質粒制作而成,克 隆質粒在單位容積內濃度高,不小心使用造成污染。
4、PCR擴增產物污染
這是PCR反應中常見的污染問題??赡茉斐蒔CR產物污染的形式是氣溶膠污染,在空氣與液體面摩擦時就可形成氣溶膠,據(jù)計算一個氣溶膠顆??珊?/span>4.8萬拷貝,因而由其造成的污染是一個值得特別重視的問題。
1、若核酸樣本溢出:
立即用布或紙巾覆蓋,由外圍向z心傾倒10%的次氯酸消 毒劑,約30分鐘后,清除污染物品,再用次氯酸消 毒劑擦拭,并用75%酒精噴灑,移動紫外車定點照射1小時。
2、其他不明情況污染:
1、暫停所有實驗操作;
2、清理實驗室內所有物品,尋找污染來源;
3、加大實驗室的通風;
4、對實驗室內所有表面(臺面、地面及墻面) 進行消毒;
5、75%酒精空中噴霧;
6、開啟紫外消毒裝置,延長紫外照射時間(4小時以上);
7、以上措施每日進行,直至污染消除;用新試劑及確認無 污 染的器材進行原污染項目的試劑空白檢測,連續(xù)3次均陰性后方可進行常規(guī)檢測。
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